-
A В процессе настройки системы в избытке присутствуют такие компоненты, как праймеры и ферменты, но не избыток шаблонов.Молекулы матричной ДНК случайным образом попадают в каждую маленькую реакционную систему.После амплификации ПЦР система, содержащая матрицу, завершает амплификацию, а система не содержит матрицу без амплификации.
-
A Причина: Штамм мутировал, и текущий зонд не подходит для обнаружения;нуклеиновая кислота, вызванная методом экстракции (неспособность полностью извлечь бактерии, грибы и т. д., включенные в образец), не может быть обнаружена;
Проверка исключения: можно проверить выделение ДНК из культуры с последующей амплификации с помощью наших зондов;рекомендуется, чтобы посев крови и анализ на нуклеиновые кислоты проводились в одном и том же образце крови.
-
A Стандарт оценки ≥ 3 положительных капель, но для положительных капель в критической точке необходимо провести углубленный анализ в сочетании с отрицательными/положительными материалами контроля качества.Когда есть вертикальная линия сигналов, это оценивается как неположительный сигнал.
Для образцов с низкой концентрацией для регулировки загрузки образца можно выбрать буфер с более высоким значением кратности.
-
A Плазма: рекомендуется ≥ 2 мл, компоненты относительно просты, загрязнение ДНК человека удалено.Состав нуклеиновой кислоты проще, а концентрация бактериальной нуклеиновой кислоты выше, что удобно для обнаружения.
Примечание: скорость вращения не должна быть слишком высокой во время центрифугирования, иначе это легко приведет к потере внутриклеточных бактерий и повлияет на окончательный результат теста;
Цельная кровь: рекомендуется ≥ 4 мл, компоненты относительно полные, консистенция с образцами культуры крови хорошая, но есть загрязнение ДНК человека.
-
A Бактерии (грамположительные бактерии, грамотрицательные бактерии), инвазивные грибы, вирусы.В то же время также может быть проведено обнаружение гена лекарственной устойчивости.
-
A Рекомендуется поставить контрольный опыт по делению.Если не установлено, обычно используйте интенсивность флуоресценции 3000 в качестве пороговой точки или используйте отрицательный кластер в качестве эталона для оценки положительного результата.Вы можете обратиться к опыту проточной цитометрии, чтобы сделать деление.
-
A Количественная оценка флуоресценции основана на кривой усиления.Сигнал обнаружения каждого цикла будет рассчитываться по логарифму 2 в степени N, который можно использовать только для различения разницы более чем в 2 раза.Цифровая система ПЦР может обнаруживать различия в экспрессии генов всего в 0,1 раза по формуле расчета распределения Пуассона.
-
A Что касается частоты мутаций, цифровая ПЦР может достигать 0,01% или менее, а для микроорганизмов может быть достигнута единственная копия;ОТ-ПЦР может достигать только 1%.
