-
A В процессе конфигурации системы компоненты, такие как праймеры и ферменты, находятся в избытке, но шаблоны не в избытке. Шаблон ДНК -молекулы случайным образом входит в каждую небольшую реакционную систему. После амплификации ПЦР система, содержащая шаблон, завершает усиление, и система не содержит шаблон без усиления.
-
A Причина: штамм мутируется, и ток -зонд не подходит для обнаружения; Нуклеиновая кислота, вызванная методом экстракции (неспособность полностью извлекать бактерии, грибы и т. Д., Включенные в образце), не может быть обнаружена;
Проверка исключения: ДНК -экстракция из культуры, сопровождаемая амплификацией с нашими зондами, может быть проверена; Рекомендуется, чтобы культура крови и тестирование нуклеиновых кислот было одним и тем же образцом крови.
-
A Стандарт суждения ≥ 3 положительных капель, но для положительных капель в критической точке необходимо провести глубокий анализ в сочетании с отрицательными/ положительными материалами контроля качества. Когда существует вертикальная линия сигналов, она считается неположительным сигналом.
Образцы с низким концентрацией, для регулировки нагрузки образца можно выбрать более высокий несколько буфера.
-
A Плазма: рекомендуется ≥ 2 мл, компоненты относительно просты, а загрязнение ДНК человека удаляется. Состав нуклеиновой кислоты проще, а концентрация бактериальной нуклеиновой кислоты выше, что удобно для обнаружения.
Примечание. Скорость вращения не должна быть слишком высокой во время центрифугирования, в противном случае она легко приведет к потере внутриклеточных бактерий и повлияет на конечный результат теста;
Целая кровь: рекомендуется ≥4 мл, компоненты относительно полны, и консистенция образцов культуры крови хороша, но существует загрязнение ДНК человека.
-
A Бактерии (грамположительные бактерии, грамотрицательные бактерии), инвазивные грибы, вирусы. В то же время можно провести обнаружение генов лекарственной устойчивости.
-
A Рекомендуется создать контрольный эксперимент для деления. Когда он не установлен, обычно используйте интенсивность флуоресценции 3000 в качестве пороговой точки или используйте отрицательный кластер в качестве ссылки для суждения о положительстве. Вы можете обратиться к опыту проточной цитометрии, чтобы сделать разделение.
-
A Количественная оценка флуоресценции основана на кривой амплификации. Сигнал обнаружения каждого цикла будет рассчитываться с помощью логарифма 2 к мощности N, которая может использоваться только для различения разницы в более чем 2 раза. Цифровая система ПЦР может обнаружить различия экспрессии генов в 0,1 раза в рамках формулы распределения распределения Пуассона.
-
A Для частоты мутации цифровая ПЦР может достигать 0,01% или менее, а для микроорганизмов может быть достигнута единая копия; ОТ-ПЦР может достичь только 1%.
