Цифровая ПЦР-система RainSure Droplet Вопросы и ответы

1. Образцы ДНК:
OD260/280 = 1,6-1,8
Концентрация ≥ 10 нг/мкл
Объем ≥ 10 мкл
Доставка на льду (пакеты со льдом)

2. Образцы РНК:
OD260/280 = 1,8-2,0
Концентрация ≥ 20 нг/мкл
Объем ≥ 20 мкл
Поставляется на льду (сухой лед)

3. Праймеры для ddPCR:
Концентрация = 450 нМ-900 нМ

4. Зонд ddPCR:
Концентрация = 250 нМ

1. Запустите установочный файл в режиме администратора

2. Установите английский язык в качестве языка по умолчанию.

Чрезвычайно низкая концентрация образца.Для погранично-положительного необходимо провести углубленный анализ в сочетании с отрицательными/положительными материалами контроля качества.

Целевой штамм (штаммы) мог быть мутирован, низкая эффективность извлечения нуклеиновой кислоты.

Для использования сторонних реагентов необходимо оптимизировать и проверить систему RainSure dPCR.Некоторые параметры включают концентрацию праймеров и зондов, совместимость ферментов с маслом для образования капель RainSure и профиль термоциклирования.

Во многом это связано с экспериментальной (манипуляционной) ошибкой.При добавлении мастер-микса рекомендуется располагать пипетку вертикально, кончиком напротив дна лунки для образца в картридже, чтобы избежать образования пузырьков воздуха в лунке для образца.Если в лунке для образца появятся пузырьки воздуха, при образовании капель будут образовываться большие пузырьки, что приведет к уменьшению количества капель.

Кроме того, не забывайте всегда сначала добавлять масло, а затем мастермикс, чтобы обеспечить успешное образование капель.Тем не менее, всегда важно проверять товар при получении, а также следить за температурой хранения, чтобы исключить ухудшение качества из-за логистики и хранения.

1. Стружка остается слишком долго (> 10 минут) после добавления масла для образования капель

2. Введение пузырьков во время добавления образца
3. Точность пипетирования

4. Не добавлять масло, а сначала мастермикс