Введение в литературу |Цифровая ПЦР-технология Rainsure и многотипный тип плазмодия и количественный мониторинг лечения

_{Название: Быстрый мультиплексный анализ паразитов малярии человека с помощью цифровой ПЦР.}

_{DOI: 10.1016/j.cca.2022.12.001}

_{Журнал: Clinica Chimica Acta}

_{Часть: Больница Хуашань при Университете Фудань}

_{Опубликовано: декабрь 2022 г.}

_{Исследовательская платформа: цифровая ПЦР-система Rainsure Scientific DropDx-2044}

_{В декабре 2022 года группа Мин Гуань и Хаоцинь Цзян из больницы Хуашань при Университете Фудань опубликовала статью «Быстрый мультиплексный анализ малярийных паразитов человека с помощью цифровой ПЦР» в журнале «Clinica Chimica Acta».}

_{В этом исследовании была создана новая мультиплексная цифровая ПЦР-система, ориентированная на быстрое молекулярное обнаружение низкоконцентрированной малярийной инфекции.Он подходит для диагностики смешанной малярийной инфекции и непрерывного мониторинга нескольких образцов, а также в качестве важного клинического метода обнаружения для абсолютного количественного определения патогенов, чтобы обеспечить быструю и точную диагностику пациентов с подозрением на малярийную инфекцию.Аналитическая чувствительность мультиплексной ПЦР составляет всего 0,557 копий/мкл, чувствительность — 98,0%, а специфичность — 100%, что особенно подходит для диагностики низкоконцентрированной малярийной инфекции и мониторинга лечебного эффекта во время лечения. .}

_{История исследований}

_{Малярия, СПИД и туберкулез признаны во всем мире одной из трех основных общественных проблем, угрожающих жизни и здоровью человека.Это паразитарное заболевание, вызываемое Plasmodium и передающееся комарами Anopheles.Согласно последнему Всемирному докладу ВОЗ о малярии, в мире зарегистрировано около 241 миллиона случаев заболевания малярией и 627 000 случаев смерти от малярии.По сравнению с предыдущим годом было зарегистрировано около 14 миллионов новых случаев и 69 тысяч новых смертей.}

_{Plasmodium – это споры, переносимые комарами Anopheles, и возбудители малярии.Четыре основных вида Plasmodium, которые паразитируют в организме человека, включая Plasmodium vivax, Plasmodium malariae, Plasmodium falciparum и Plasmodium ovale.У этих малярийных паразитов есть два хозяина: комары Anopheles и люди.У человека они паразитируют последовательно в клетках печени и эритроцитах.В эритроцитах, помимо пролиферации шизофитов, некоторые мерозоиты образуют гаметофиты и начинают начальное развитие полового размножения.}

_{В 2021 году, когда за четыре года не было случаев местной малярии, Китай был успешно признан Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) страной, свободной от малярии.В настоящее время случаи заражения малярией в основном завозятся из-за рубежа.}

_{Методы исследования}

_{С 2016 по 2021 год в больнице Хуашань было отобрано в общей сложности 39 пациентов с положительным результатом на малярию, у которых была диагностирована микроскопия;У этих пациентов было взято 70 образцов крови.Кроме того, в исследование были включены 20 здоровых людей, 20 лихорадящих больных и 6 больных с другими видами гемоинфекций.Каждый образец крови тестировали параллельно с помощью мазка крови и dPCR.Путем оптимизации односистемной четырехкратной флуоресцентно-меченой системы обнаружения зонда была подтверждена точная количественная способность dPCR, и было получено точное число копий на единицу объема клинических образцов крови малярии.Для проверки результатов, полученных с помощью dPCR, также использовали экспресс-тест.}

_{Результаты исследований}

_{Система dPCR обеспечивает быструю диагностику и количественную оценку образцов ДНК малярии.Аналитическая чувствительность мультиплексной дПЦР составляла всего 0,557 копий/мкл (95% ДИ 0,521–0,607), а ее чувствительность для диагностики клинических образцов — 98,0%, а специфичность — 100%.Кроме того, с помощью системы dPCR были обнаружены три образца множественной коинфекции Plasmodium, включая один случай тройной коинфекции Plasmodium.Путем непрерывного ежедневного тестирования образцов крови 39 пациентов, dPCR может контролировать эффективность медикаментозного лечения.Результаты показывают, что диапазон концентраций ДНК Plasmodium falciparum после лечения составляет 0 копий/мкл-5474 копий/мкл, что обеспечивает мониторинг лечебного эффекта противомалярийных препаратов в режиме реального времени.Исследование также показало, что Plasmodium легче и точнее обнаруживается с использованием образцов клеток крови с обедненной плазмой, чем с цельной кровью.}

_{Мультиплексная цифровая ПЦР-система может четко обнаруживать два или три вида смешанной малярийной инфекции в образцах цельной крови, чтобы эффективно диагностировать множественные смешанные малярийные инфекции.Это идеальное дополнение к традиционному методу микроскопического исследования мазков крови, позволяющее своевременно восполнить пропущенное выявление атипичной малярии в мазках крови и больных с низкоконцентрированной смешанной инфекцией, тем самым помогая клиницистам своевременно корректировать схемы лечения.}

_{Непрерывное наблюдение за больным до 20 дней показало, что цифровая ПЦР позволяет точно количественно определить концентрацию малярии в цельной крови больного, наглядно показать реальный инфекционный статус больного, отразить изменение заболеваемости малярией у больного во времени. , достижение цели мониторинга в режиме реального времени эффективности противомалярийных препаратов, заключается в предоставлении более надежных лабораторных данных об элиминации малярии у пациентов.}