Просмотры:0 Автор:Pедактор сайта Время публикации: 2024-11-13 Происхождение:Работает
-Фацилитации в истинной быстрой реализации цифровой технологии ПЦР в NIPT Field
В середине октября 2024 года в китайском журнале медицинской генетики, том 41, выпуск 10 статью под названием «Экспертный консенсус о применении цифровой неинвазивной пренатальной скрининго , Doi: 10.3760/cma.j.cn511374- 20240318-00176). Консенсус рассказывает о соответствующих аспектах DPCR-NIPT, включая: основные требования, объем применения, процесс обслуживания предварительного тестирования, процесс тестирования, интерпретацию отчетов, генетическое консультирование и ограничения технологии.опубликовала
Картина цифрового оборудования для ПЦР, опубликованная в экспертном консенсусе, представляет собой оригинальную картину инструмента Scientific Series Series Dropdx, и детали можно найти в разделе «Оборудование и дисплей продукта» на научном веб -сайте Rainsure ( https://www.rainsurebio.com ).
Анеуплоидия хромосомы плода является основным компонентом пренатальных скрининговых тестов, что полезно для продвижения евгеники и улучшения качества родов за счет раннего пренатального скрининга и диагностики. Анеуплоидия пренатальное тестирование-это неинвазивный, минимально инвазивный или инвазивный технологический подход, который исследует беременных женщин в течение определенного времени для оценки риска расстройств хромосомной анеуплоидии плода или для дальнейшего подтверждения диагноза. Традиционные методы пренатальной диагностики являются инвазивными, с амниоцентезом, отбор проб хорионической ворсинки и отбор проб пупок вены для анализа кариотипирования, который несет потенциальный риск выкидыша или инфекции плода. Ранний и середина тримерного рутинного пренатального скрининга сочетает в себе ультразвуковое исследование с анализом биомаркеров в сыворотке, наряду с клинической информацией, такой как материнский возраст, гестационный возраст, вес и наличие диабета, для расчета значений риска с использованием программного обеспечения для оценки. Однако чувствительность и специфичность этих методов ограничены. В 1997 году LO et al. Обнаруженная бесклеточная ДНК плода (ДНК CFF) в периферической крови беременных женщин, закладывая основу для неинвазивного пренатального тестирования (NIPT) для анеуплоидии хромосомы плода. В 2008 году LO et al. Кроме того, продемонстрировал осуществимость обнаружения анеуплоидности хромосомы плода на основе ДНК CFF в материнской плазме и крупномасштабного секвенирования генома.
На этом этапе неинвазивное пренатальное тестирование, основанное на NGS (секвенирование следующего поколения), использовалось при клиническом скрининге на трисомию плода 21, трисомию 18 и синдромы трисомии 13 и продемонстрировало высокую чувствительность, специфичность и частоту обнаружения при беременных высокого риска. Тем не менее, на NGS-NIPT влияют множество факторов, происходящих из плода, матери, процесса секвенирования и анализа данных, которые могут привести к ложноположительным или ложноотрицательным результатам. Кроме того, стоимость тестирования NGS-NIPT стоит дорого, что затрудняет быстрое и эффективное реализацию в больших масштабах.
С внедрением микрофлюидной технологии, цифровая ПЦР (DPCR), которая представляет технологию ПЦР третьего поколения, продемонстрировала более высокую эффективность и чувствительность обнаружения. Было показано, что DPCR имеет потенциал для более прямого, быстрого и экономически эффективного развития в приложениях NIPT-хромосомной анеуплоидии. Кроме того, комбинация технологий DPCR-NIPT и NGS-NIPT для скрининга может еще больше повысить точность, безопасность и своевременность пренатальных скрининговых тестов для хромосомных анеуплоидных анеуплоидов плода.
Кроме того, рекомендации, связанные с консенсусом, приведены ниже:
Сводка рекомендаций.
[Рекомендация 1] Стоимость тестирования DPCR-NIPT сопоставима с стоимостью серологического скрининга, в то время как его положительный показатель обнаружения аналогичен стоимости NIPT, что делает его многообещающей альтернативой пренатальному скринингу. Это может привести к формированию последовательного пренатального скрининга и диагностической стратегии 'DPCR-NIPT для первоначального скрининга, NIPT для вторичного скрининга и инвазивной пренатальной диагностики. '.
[Рекомендация 2] Рекомендуется выполнять DPCR-NIPT в соответствии с требованиями для персонала, организации, реагентов и оборудования.
[Рекомендация 3] Ссылаясь на серологический скрининг и NIPT, DPCR-NIPT может использоваться для одновременного скрининга Trisomy 21, Trisomy 18 и Trisomy 13. Кроме того, учитывая, что частота и бремя синдрома Тернера (45, х) и синдрома дигёржа (22q11.2Dehition Syndrome), не менее чем из тризомии, 18, синдрома, не менее, не меньше, чем у тризомии, синдрома, не меньше, чем у тризомии, синдрома, не меньше, чем у тризомии, синдрома, не меньше, чем у тризомии, синдрома. и 22Q11.2ds также могут быть выполнены с использованием DPCR-NIPT.
[Рекомендация 4] Рекомендуется, чтобы беременные женщины проходили скрининг DPCR-NIPT, чтобы классифицировать соответствующие, предостережительные и неуместные группы населения и обеспечить получение информированного согласия.
[Рекомендация 5] Различные лаборатории могут установить локализованные стандартные процедуры DPCR-NIPT и системы контроля качества в соответствии с их собственными условиями и предварительным тестированием и внутрипроцестным процедурами и контролем качества.
[Рекомендация 6] Критерии определения риска хромосомных заболеваний плода должны основываться на результатах DPCR-NIPT.
[Рекомендация 7] Стратегии генетического консультирования и лечения должны быть предоставлены для различных рисков, предложенных в результате теста.
[Рекомендация 8] Учитывая характеристики CFFDNA и DPCR-NIPT, рекомендуется, чтобы медицинские учреждения установили консультирование ~ последующее ретроспективное механизм, а также обеспечивали надлежащие последующие работы.
Что касается технических проблем DPCR-NIPT
Инструмент: Существуют строгие требования к производительности оборудования. Поскольку цифровые устройства ПЦР, используемые для NIPT, должны дифференцироваться между нормальными и аномальными различиями в количестве копий DNA CFF (обычно менее 4%), они требуют превосходной точности и воспроизводимости. Учитывая, что разность количества копий между нормальной и аномальной ДНК CFF находится в пределах 5%, увеличение количества капель (то есть числа раздела) для усиления общего количества CFDNA в образце может увеличить разницу в нормальных и аномальных количествах копий CFF, тем самым повышая чувствительность к обнаружению.
В исследовании DAI [16] было рассчитано минимальное количество капель, необходимых в определенных условиях. При CFFDNA 5% (0,05) и PDR 30% (0,3) потребовалось приблизительно 18 000 капель или реакций ПЦР, чтобы отличить анеуплоидную беременность от анеуплоидной беременности с уровнем достоверности 95% (1,96 раза).
Реагенты: используемые для NIPT требуют реализации нескольких тестов, тем больше целей, тем более точным тестом. Принцип реагента состоит в том, чтобы усилить разность количества копий между нормальными и ненормальными образцами плода путем обнаружения нескольких целей. Например, предполагая, что разница в числах количества копий 1% между нормальным и ненормальным плодом, разница между 100 копиями одной цели составляет 1 копию. Если протестировано 10 целей, разница будет поставлена на 10 копий, что повысит чувствительность теста.
В исследовании Лашакова [15] авторы использовали 16 пары праймеров и два флуоресцентно меченых зонда с яростной кислотой для хромосомы 21 и хромосомы 18 соответственно. Этот тест был подтвержден в слепом анализе на образцах плазмы от 30 беременных женщин, подверженных риску синдрома вниз по синдрому 21, с диапазоном риска от 1: 4 до 1: 801. Результаты теста и инвазивных диагностических процедур были в идеальном согласии (чувствительность, специфичность, положительная прогностическая ценность и отрицательная прогностическая ценность были на 100%). В исследовании, проведенном DAI [16], 10 наборов датчиков праймеров использовались для мультиплексного тестирования хромосом 21, 18 и 13. В исследовании TAN [14], 10 нг сломанной gDNA и различных количества пар праймеров (1, 5, 10 и 20 пары для CHR21 и CHR18, соответственно, использовались для проверки между числами примимеров, и число, обнаруженные, и число, обнаруживаемых, и почетные параметрические параметры. Результаты показали, что количество обнаруженных молекул ДНК -мишени сильно зависит от количества пар праймеров, и что увеличение количества пар праймеров может увеличить количество обнаруженных молекул ДНК -мишени, учитывая определенное количество ДНК.
Выбор более чувствительного цифрового оборудования для ПЦР и точно разработанного и проверенных мультиплексированных цифровых реагентов ПЦР является ключом к повышению чувствительности и специфичности анализа DPCR-NIPT.
О дожди Scientific Ltd. Co.
Rainsure Scientific - это инновационная компания, занимающаяся точной диагностикой. Придерживаясь миссии «Инновации, интеллектуальное производство, укрепление здоровья », Rainsure Scientific в основном занимается разработкой инновационных диагностических платформ и диагностических решений IVD. Компания разработала ведущие мировые научные инструменты и молекулярные диагностические продукты, в том числе микрофлюидные исследовательские платформы, цифровые системы ПЦР и вспомогательные наборы реагентов, основанные на непрерывных технологических достижениях компании в области микрофлюидики и интеллектуального производства. Все члены команды-основателя компании закончили университеты Лиги плюща и работали на ряд международно признанных производителей наук о жизни, с богатым опытом в отрасли и передовыми перспективами. Rainsure Scientific стремится расширить возможности клиентов инновационными технологиями и интеллектуальным производством для развития развития здравоохранения.
