Просмотры:0 Автор:Pедактор сайта Время публикации: 2022-12-15 Происхождение:Работает
Название: Быстрый мультиплексный анализ паразитов малярии на человеке с помощью цифровой ПЦР
Doi: 10.1016/j.cca.2022.12.001
Журнал: Clinica Chimica Acta
Отдел: больница Хуашан, связанная с университетом Фудана
Опубликовано: декабрь 2022 года
Исследовательская платформа: Rainsure Scientific Dropdx-2044 Цифровая ПЦР-система
В декабре 2022 года команда Ming Guan и Haoqin Jiang из больницы Huashan, связанной с Университетом Фудана, опубликовала статью «Быстрый мультиплексный анализ паразитов малярии человека с помощью цифровой ПЦР » в журнале »Clinica chimica acta ».
Это исследование установило новую мультиплексную цифровую ПЦР-систему, ориентированную на быстрое молекулярное обнаружение инфекции малярии с низкой концентрацией. Он подходит для диагностики смешанной малярийной инфекции и непрерывного мониторинга множественных образцов и в качестве важного метода клинического обнаружения для абсолютного количественного определения патогенов, чтобы обеспечить быстрый и точный диагноз пациентов, подозреваемых в малярийной инфекции. Аналитическая чувствительность мультиплексной ПЦР составляет всего 0,557копии/мкл, чувствительность составляет 98,0%, а специфичность составляет 100%, что особенно подходит для диагностики инфекции малярии с низкой концентрацией и мониторинга лечебного эффекта во время лечения.
Исследование
Малярия, СПИД и туберкулез признаны во всем мире как одна из трех основных общественных проблем, которые подвергают опасности человеческую жизнь и здоровье. Они представляют собой паразитическое заболевание, вызванное плазмодием и передаваемым комарами Anopheles. Согласно последнему мировому отчету о малярии, в мире составляет около 241 миллиона случаев малярии и 627 000 смертей от малярии. По сравнению с предыдущим годом было около 14 миллионов новых случаев и 69 000 новых смертей.
Plasmodium - это спор, передаваемая комаром Anopheles, и является причинным агентом малярии. Четыре основных вида плазмодия, которые паразитируют человеческое тело, в том числе Plasmodium vivax, Plasmodium malariae, Plasmodium falciparum и оваль Plasmodium. Эти малярические паразиты имеют два хозяева, анофелесомы и люди. Они последовательно паразитируют в клетках печени и эритроцитах. В эритроцитах, в дополнение к пролиферации шизофитов, некоторые мерозоиты образуют гаметофиты и начинают первоначальное развитие сексуального размножения.
В 2021 году, в связи с тем, что за четыре года в коренных случаях в коренных народах Китай был успешно признан Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) страной без малярии. В настоящее время случаи инфекции малярии в основном импортируются из -за рубежа.
Методы исследования
В общей сложности 39 пациентов с малярией, диагностированными по микроскопии, были отобраны из больницы Хуашан с 2016 по 2021 год; 70 образцов крови были собраны у этих пациентов. Кроме того, в это исследование были включены 20 здоровых людей, 20 фебрильных пациентов и 6 пациентов с другими типами инфицированных крови паразитов. Каждый образец крови проверяли параллельно с помощью мазока крови и DPCR. Оптимизируя систему обнаружения зондов, меченную в четверти, была проверена на флуоресцентной флуоресцентной системе, точная количественная способность DPCR была проверена, и точное количество копий на единицу объема клинических образцов крови малярии был выведен. Быстрый диагностический тест также использовался для проверки результатов, полученных DPCR.
Результаты исследований
Система DPCR обеспечивает быструю диагностику и количественную оценку образцов ДНК малярии. Аналитическая чувствительность мультиплексного DPCR составляла всего 0,557 копии/мкл (95%ДИ 0,521-0,607), а его чувствительность к диагностике клинических образцов составила 98,0%, а его специфичность составляла 100%. Кроме того, система DPCR обнаружили три множественных образца коинфекции Plasmodium, включая один случай коинфекции тройного плазмодия. Непрерывно тестируя ежедневные образцы крови у 39 пациентов исследования, DPCR может отслеживать эффективность лечения лекарств. Результаты показывают, что диапазон концентрации ДНК Plasmodium falciparum после лекарства составляет 0 экземпляров/мкл-5474 копия/мкл, реализуя мониторинг лечебного эффекта противомалярийных препаратов. Исследование также показало, что Plasmodium был легче и более положительно обнаружен с использованием образцов клетки крови в плазме, чем цельная кровь.
Мультиплексная цифровая система ПЦР может четко обнаружить два или три вида смешанных малярийных образцов цельной крови, чтобы эффективно диагностировать множественные малярические смешанные инфекции. Это идеальное добавление к традиционному методу микроскопического обследования крови, который может своевременно компенсировать пропущенное обнаружение атипичной малярии при мазке крови и пациентов с низкой концентрацией смешанной инфекции, что помогает клиницистам схемы лекарств своевременно.
Непрерывный мониторинг пациента в течение до 20 дней показал, что цифровая ПЦР может точно определить концентрацию малярии во всей крови пациента, визуально показывает реальное состояние инфекции пациента и отражает изменение частоты инфекции малярии у пациента во времени, достигая цели в реальном времени, эффективность антималарийных препаратов, обеспечивает более достоверные доказательства для устранения.